小鼠眼科模型構(gòu)建

一、小鼠眼科模型的核心價值與定義

1. 生物學(xué)優(yōu)勢

• 基因組同源性：小鼠與人類基因組相似度達(dá)80%-90%，關(guān)鍵視覺基因（如視蛋白、晶狀體蛋白）保守性高，可精準(zhǔn)模擬人類眼病機(jī)制。

• 眼部結(jié)構(gòu)相似性：視網(wǎng)膜細(xì)胞組成（視錐/視桿細(xì)胞比例）、房水動力學(xué)、血-視網(wǎng)膜屏障等結(jié)構(gòu)與人類高度接近，尤其適合研究視網(wǎng)膜疾病和青光眼。

2. 科研應(yīng)用定位
   作為疾病機(jī)制研究、藥物篩選和基因治療驗(yàn)證的核心工具，尤其在遺傳性眼病研究中不可替代。

二、主要眼科疾病模型分類及構(gòu)建方法

1. 青光眼模型

• 遺傳性模型：

• DBA/2J小鼠：自發(fā)虹膜wei縮、房角粘連，9月齡后出現(xiàn)高眼壓及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGC）進(jìn)行性死亡，模擬繼發(fā)性閉角型青光眼。

• 基因編輯模型：

• OPTN E50K突變：模擬正常眼壓性青光眼，表現(xiàn)RGC丟失而無明顯眼壓升高。

• TBK1突變：誘導(dǎo)RGC凋亡和膠質(zhì)細(xì)胞增生。

• 誘導(dǎo)性模型：

• 激光光凝房角：破壞房水流出通道，實(shí)現(xiàn)可調(diào)控的高眼壓。

• 前房注射透明質(zhì)酸鈉：機(jī)械性阻塞房角，24小時內(nèi)眼壓顯著上升。

2. 白內(nèi)障模型

• 先天性白內(nèi)障：

• 基因突變模型：Cryg（γ-晶狀蛋白基因）突變導(dǎo)致晶狀體蛋白聚集，如aphakia、Cat2突變體。

• 轉(zhuǎn)錄因子缺陷：FoxE3、Maf基因敲除引發(fā)晶狀體發(fā)育異常。

• 后天性白內(nèi)障：

• 化學(xué)誘導(dǎo)：亞硝ji脲（ENU）誘發(fā)晶狀體氧化損傷。

3. 視網(wǎng)膜色素變性（RP）

• 遺傳模型：

• RD小鼠：Pde6b基因無義突變（外顯子7），導(dǎo)致cGMP代謝異常和視桿細(xì)胞變性（RD1/RD10亞系）。

• RHO敲除小鼠：視紫紅質(zhì)基因缺陷，模擬常染色體顯性RP。

• 誘導(dǎo)模型：

• N-甲基-N-亞硝ji脲（MNU） ：特異性損傷光感受器細(xì)胞，7天內(nèi)出現(xiàn)視網(wǎng)膜變性。

4. 其他重要模型

• 角膜新生血管增生：

• 堿灼傷法：角膜基質(zhì)注射NaOH，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）過表達(dá)。

• 年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD）：

• 濕性AMD：激光誘導(dǎo)脈絡(luò)膜新生血管（CNV）。

• 干性AMD：高氧環(huán)境暴露（75% O?）誘發(fā)視網(wǎng)膜色素上皮wei縮。

• 視神經(jīng)損傷：

• 視神經(jīng)夾傷/缺血再灌注：模擬創(chuàng)傷性或缺血性視神jing病變。

三、小鼠眼科模型構(gòu)建模型評估的核心技術(shù)

1. 功能學(xué)檢測

• 視動反應(yīng)（OKR） ：定量評估空間視力，如青光眼模型視力降至0.228周/度（正常值0.397周/度）。

• 視網(wǎng)膜電圖（ERG） ：記錄光感受器（a波）和雙極細(xì)胞（b波）功能，RP模型振幅顯著降低。

2. 結(jié)構(gòu)學(xué)分析

• 光學(xué)相干斷層掃描（OCT） ：活體監(jiān)測視網(wǎng)膜層厚度和視神經(jīng)纖維層（RNFL）變化。

• 熒光眼底成像：動態(tài)觀察血管滲漏和新生血管（如CNV模型）。

3. 眼壓監(jiān)測

• 回彈式眼ya計(jì)（Tonolab®） ：無創(chuàng)高頻測量，置信度>95%。

4. 分子病理驗(yàn)證

• TUNEL染色：量化RGC凋亡率。

• qPCR/Western Blot：檢測疾病相關(guān)基因（如VEGFA）表達(dá)水平。