Y迷宮實驗材料 大鼠 小鼠

儀器、耗材 Y-迷宮由三等分輻射式迷路箱   控制儀

一、Y迷宮實驗方法

1． 篩（預)選

（1）將大鼠放入Y-迷宮箱中適應(yīng)3～5 min后，給予適當電刺激至其對3臂均探索進入為止。選擇活躍，對電刺激反應(yīng)較敏感，逃避反應(yīng)迅速者供測試用。淘汰反應(yīng)過于遲鈍或特別敏感的大鼠。

（2）預選出達到電刺激次數(shù)≤3次時連續(xù)2次正確反應(yīng)的動物，即對電刺激反應(yīng)較敏感的大鼠供實驗用。

（3）在上述初步篩選的基礎(chǔ)上，通過正式迷宮訓練，淘汰達不到學會標準(學不會)的大鼠。

2． 正誤判定的標準

大鼠受電刺激后從起步區(qū)直接逃到安全區(qū)或通電后10s內(nèi)一次性跑向安全區(qū)為“正確反應(yīng)”，若逃到無燈光的另一臂，則記為錯誤反應(yīng)。

3． 達標（學會）標準

（1）連續(xù)10次中有9次或以上正確反應(yīng)(正確反應(yīng)率≥90％)定為學會標準。

（2）每個實驗日進行20次訓練測試，錯誤反應(yīng)次數(shù)（errors number EN）≤2次。全天總反應(yīng)時間（total reaction time TRT）≤120s作為判定大鼠學會的標準。因為EN反映大鼠反應(yīng)的正確程度，TRT反映大鼠反應(yīng)時間的長短，可綜合評價大鼠的學習記憶能力，因而此標準更為合理。

以上為每只大鼠達標(學會)標準，全組大鼠達標(學會)標準為全組正確率(學會動物數(shù)／該組動物總數(shù)×)達85％ 以上。

4． 學習測試

實驗時先將大鼠放入迷宮中適應(yīng)3～5 min，然后再開始正式實驗。

（1）隨機休息法：安全區(qū)以無規(guī)則次序變換，以訓練大鼠辨別燈光刺激及安較好的的能力，大鼠受電刺激后逃到安全區(qū)后，燈光繼續(xù)作用10～15s，熄燈后結(jié)束一次測試，大鼠所在支臂就作為下一次測試的起點，兩次測試時間間隔為30s或休息1 min 后再予以第2次測試，依次重復，測試至達連續(xù)9／10標準。

（2）隨機不休息法：安全區(qū)以無規(guī)則的次序變換開始時，對大白鼠所在支臂與另一支臂通電，動物在電刺激下逃竄至燈光區(qū)后再保持l0s或30s為一次測試。然后動物所在支臂為下次測試的起始位置進行下一次測試。

（3）順序法：三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂輪流作為起步區(qū)或安全區(qū)。

以上方法還可以分為兩類：①每天固定訓練次數(shù)，一般是20次，連續(xù)訓練3～4 d。大鼠一般都能達到學會標準。②不固定訓練次數(shù)，采用分段連續(xù)訓練法，即每訓練10次，休息1 min，連續(xù)訓練直到學會為止，訓練在1 d內(nèi)完成。

5． 記憶保持（再現(xiàn)）測試

學習測試24 h、48 h、1周、30 d后，再以同樣方法測試至9／10標準，正確反應(yīng)次數(shù)定為A，以A／10表示記憶的保持能力，此值越高說明記憶力越好。

二、觀察指標

1. 達標所需的訓練次數(shù)(電刺激次數(shù)、反應(yīng)次數(shù)、測試次數(shù))：用動物學習達到學會標準前所需的測試數(shù)，表示其空間分辯反應(yīng)的學習記憶成績。

2. 達標所需的天(日)數(shù)：記錄每只大鼠達到學會標準所用的日數(shù)。

3. 錯誤反應(yīng)次數(shù)(errors number EN )：一個實驗日完成所有反應(yīng)中錯誤反應(yīng)的次數(shù)。

4. 全天總反應(yīng)時間(total reaction time TRT)：動物的反應(yīng)時(潛伏期)指從信號燈亮開始至大鼠第1次逃至燈亮區(qū)為止所耗的時間，全天總反應(yīng)時是一個實驗日(全天)完成所有反應(yīng)(包括正確反應(yīng)和錯誤反應(yīng))所需時間。

5. 主動回避率：大鼠在燈亮后但未通電的5s內(nèi)完成逃避反應(yīng)的次數(shù)占總反應(yīng)次數(shù)的百分率。安全區(qū)燈亮，電刺激尚未開始時，大鼠即逃往安全區(qū)表明大鼠已經(jīng)形成了明暗辨別條件反射(主動回避反應(yīng))。

6. 正確反應(yīng)率(行為正確率)：正確反應(yīng)數(shù)占總測試數(shù)的百分比。

7. 全組正確率：學會動物數(shù)占該組動物總數(shù)的百分比。

8. 3d學會率：訓練第3d達學會標準的動物數(shù)占該組動物總數(shù)的百分比。動物數(shù)占該組動物總數(shù)的百分比。